1、简介
血-视网膜屏障（BRB）外屏障位于视网膜色素上皮细胞之间，完整的的BRB能够有效的调节控制视网膜下液并且维持RPE和视网膜细胞的健康。外屏障的破坏会导致RPE细胞之间旁通透性升高，液体的渗漏会导致视网膜水肿。
卵磷脂络合碘（LBI）的预处理可以减少由CoCl2所致的缺氧应激对ARPE-19细胞紧密连接(TJs)造成的破坏。研究显示LBI可以通过降低MCP-1和CCL-11的水平并减少他们的表达来保护TJs。另外，LBI预处理也可以保护TJs免受VEGF诱导的损伤，这也表明LBI可能对DME有治疗有用。
2、摘要
目的：
研究在缺氧状态下卵磷脂络合碘（LBI）是否能保护视网膜色素上皮细胞的紧密连接。
方法：
体外培养卵磷脂络合碘预处理过的人视网膜色素上皮细胞（ARPE-19）。为模拟低氧条件，细胞在CoCl2条件下孵育。比较单纯LBI组，LBI+CoCl2组，单纯CoCl2组上皮细胞紧密连接（TJs）的完整性。同时测定了条件介质中细胞因子的水平。
结果：
与对照组相比，CoCl2组紧密连接蛋白-1（ZO-1）密度显著减少。（CoCl2组.7±.4VS对照组.6±.2，平均±标准偏差），但在LBI+CoCl2组下降不明显（.0±.1）。CoCl2组单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和趋化因子(C-CMotif)配体-11(CCL-11)明显高于对照组。(.8±43.3VS.7±68.3pg/mLforMCP-1,and15.2±12.9VS12.5±6.1pg/mLforCCL-11).LBI预处理之后,两种细胞因子水平分别下降到.6±23.8(MCP-1)、5.46±1.9pg/mL（CCL-11)。阻碍单核细胞趋化蛋白-1或ccl-11在缺氧状态也表现出同样的TJs保护作用。
结论：
LBI在缺氧状态下对TJs有保护作用。
3、结果
Figure1：免疫染色ZO-1（一种TJ蛋白）培养的ARPE-19细胞的显微照片，该结果证明了LBI能够保护缺氧负荷下的TJs，免疫荧光显微图像显示ARPE-19周围有ZO-1（红色）存在，将细胞暴露于CoCl2引起TJ的破坏（（a），（b）箭头）。当暴露于CoCl2的ARPE-19细胞用LBI预处理时，与对照（（c），（d））相比，ZO-1形态没有显着差异。此外，TJs的完整性也用信号强度来表达(n=5)(e).虽然加入CoCl2之后与对照组相比信号显著下降，但用LBI预处理过后再加入CoCl2结果与对照组相比差异不明显。?p0.05,非重复方差分析。
Figure2:低氧诱导的MCP-1和CCL-11的增加可由LBI的预处理所抑制，ELISA测定条件培养基中的几种细胞因子（n=5），在加入CoCl2或者LBI预处理之后IL-8没有显著变化（a），加入CoCl2之后，观察到IL-6的水平增加，用LBI预处理之后加入CoCl2，IL-6水平降低（b）。加入CoCl2之后MCP-1的水平显著升高，但如用LBI预处理过则不会出现这种现象（c），
对于CCL-11也观察到类似的趋势（d）。?p0.05,??p0.01,非重复方差分析
Figure3:通过阻断MCP-1或CCL-11也抑制缺氧引起的紧密连接中断。将ARPE-19细胞暴露于CoCl2导致TJ破坏（（d）箭头）。当用抗MCP-1或抗CCL-11抗体预处理细胞时，与对照（（e），（f））相比，ZO-1形态变化减少。因此，阻断MCP-1和CCL-11可以保护TJs因缺氧导致的改变。
Figure4:LBI可以保护紧密连接免受VEGF的破坏，在培养基中加入50pg/ml的VEGF，6h。用抗ZO-1抗体染色ARPE-19细胞（（a）-（d）），并评估TJs构象。注意到在VEGF之后观察到TJs被破坏（（b）箭头）。在添加VEGF之前用LBI预处理可以保护TJ免受破坏（d）
来源：
MasahikoSugimotoandMineoKondo，Lecithin-BoundIodinePreventsDisruptionofTightJunctionsofRetinalPigmentEpithelialCellsunderHypoxicStress（J），JournalofOphthalmology，.
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